Subaru Hasegawa are ambiția de a deveni una dintre cele mai bune superstaruri ale baschetului din toate timpurile. Totuși, acest lucru se oprește aparent atunci când echipa de baschet a școlii sale își încetează activitățile timp de un an. Șocat de veste, decide să nu se mai implice în baschet.
Într-o zi, mătușa sa, Mihoshi Takamura, îl invită să antreneze echipa de baschet feminin a Academiei Keishin în ceea ce privește practicarea acestui sport, iar el acceptă cu reticență. Îi întâlnește pe elevele de clasa a șasea, Tomoka Minato, Maho Misawa, Airi Kashii, Hinata Hakamada și Saki Nagatsuki, și începe să le antreneze în acest sport cu un singur scop: să învingă toți adversarii puternici de pe parcurs.
Ro-Kyu-Bu! urmărește eforturile a cinci fete de la școala primară și ale antrenoarei lor în timp ce își îmbunătățesc stilul drăguț de a juca baschet.